禽流感（H9 亞型）血凝抑制試驗陽(yáng)性血清使用說(shuō)明書(shū)
日期：2023-12-05 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽：1188 次
【獸藥名稱(chēng)】
通用名稱(chēng)：禽流感（H9 亞型）血凝抑制試驗陽(yáng)性血清
商品名稱(chēng)：無(wú)
英文名稱(chēng)：Avian Influenza Virus (H9 subtype) positive
Serum of Blood Hemagglutination Inhibition Test
漢語(yǔ)拼音：Qiuliugan(H9yaxing)Xueningyizhishiyan
Yangxingxueqing
【【主要成分與含量】本品系用禽流感病毒（H9 亞型）感染 SPF
雞制備，效價(jià)≥1:128（即 27）
【性狀】微黃色或淡紅色澄清液體，久置后有少量沉淀。
【作用與用途】用于禽流感（H9 亞型）病毒血凝抑制（HI）試
驗陽(yáng)性對照
【用法與判定】
1 材料
移液器及吸頭、1/15mol/L PBS（pH 值 7.0-7.2）、96 孔微量血凝
板（V 型）、1%（V/V）雞紅細胞懸液、加樣槽等。
2 試驗操作
2.1 血凝試驗（HA）
96 孔微量血凝板 1-12 孔加入 PBS 0.025ml，取禽流感（H9）血
凝抑制試驗抗原 0.025ml 加入第 1 孔中，反復稀釋 5～10 次混勻，從第 1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔，稀釋混勻取 0.025ml 加入第 3 孔，
依此倍比稀釋至第 11 孔。每孔加入 PBS 0.025ml，再加入 1%（V/V）
雞紅細胞懸液 0.025ml。第 12 孔為紅細胞對照孔。將血凝板震蕩混勻，
室溫放置 15～40 分鐘。
2.2 配制 4 個(gè)血凝單位抗原（4HAU）
依據血凝效價(jià)，配制 4 個(gè)血凝單位抗原（4HAU）。舉例:血凝效
價(jià)為 1:128，即 128/4=32（即稀釋倍數為 1:32）。取 PBS 9.0ml,加入抗
原 1.0ml,（即成 1:10 稀釋?zhuān)┱鹗幓靹蛉?1.0ml，加入 2.2ml PBS 中，
使最終濃度為 1:32。對其血凝價(jià)進(jìn)行回歸檢驗后，2～8℃存放待用。
2.3 血凝抑制試驗（HI）
96 孔微量血凝板 1-11 孔加入 PBS 0.025ml，第 12 孔加入 PBS
0.05ml，取本品 0.025ml 加入第 1 孔中，反復稀釋 5～10 次混勻，從
第 1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔，稀釋混勻取 0.025ml 加入第 3 孔，
依此倍比稀釋至第 10 孔。取 4HAU 于 1-11 孔每孔加入 0.025ml，血
凝板震蕩混勻，37℃作用 20 分鐘。再每孔加入 1%（V/V）雞紅細胞
懸液 0.025ml。第 11 孔為 4HAU 對照孔，第 12 孔為紅細胞對照孔。
將血凝板震蕩混勻，室溫放置 15～40 分鐘。
2.4 結果判定 將血凝板傾斜 60 度，若 4HAU 對照孔無(wú)紅細胞凝
集，紅細胞對照孔有紅細胞凝集，且呈明顯流淌的淚滴狀時(shí)，試驗成
立，可判讀結果。使紅細胞凝集被完全抑制的血清最高稀釋度，判為
血清 HI 效價(jià)。
【注意事項】1.本品避免反復凍融使用。
2.倍比稀釋時(shí)，吸液、吐液動(dòng)作不應過(guò)快，防止污染其他孔及取
量不準確。
3.4HAU 應現用現配，使用時(shí)充分混勻。
4.使用 1%雞紅細胞懸液時(shí)，應輕搖混勻。
5.因環(huán)境溫度不同，判定結果時(shí)，可依據對照孔情況，適當調整
作用時(shí)間。
6.設立陰、陽(yáng)性血清對照，且當陰性對照血清 HI 效價(jià)≤1:4、陽(yáng)性
對照血清 HI 效價(jià)與已知結果相比，誤差≤1 個(gè)滴度時(shí)，試驗方可成立。
【規格】 2ml/瓶
【貯藏與有效期】 -15℃以下保存，有效期為 12 個(gè)月
【包裝】 10 瓶/盒
供獸醫診斷使用
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