禽流感（H9 亞型）血凝抑制試驗抗原使用說(shuō)明書(shū)
日期：2023-12-06 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽：951 次
【獸藥名稱(chēng)】
通用名稱(chēng)：禽流感（H9 亞型）血凝抑制試驗抗原
商品名稱(chēng)：無(wú)
英文名稱(chēng)：Avian Influenza Virus(H9 subtype) Antigen for
Blood Hemagglutination Inhibition Test
漢 語(yǔ) 拼 音 ： Qiuliugan(H9 yaxing)Xueningyizhishiyan
Kangyuan
【主要成分與含量】本抗原為滅活的禽流感（H9 亞型）病毒，
血凝效價(jià)≧1:128（即 2
7
）
【性狀】為疏松團塊。
【作用與用途】適用于血凝抑制試驗檢測禽流感（H9 亞型）病
毒抗體
【用法與判定】
1 材料
移液器及吸頭、1/15mol/L PBS（pH 值 7.0-7.2）、96 孔微量血
凝板（V 型）、1%（V/V）雞紅細胞懸液、加樣槽等。
2 試驗操作
2.1 血凝試驗（HA）
2.1.1 96 孔微量血凝板 1-12 孔加入 PBS0.025ml，取抗原 0.025ml
加入第 1 孔中，反復稀釋 5～10 次混勻，從第 1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔，稀釋混勻取 0.025ml 加入第 3 孔，依此倍比稀釋至第 11 孔，
第 12 孔作為紅細胞對照孔。每孔補加 PBS0.025ml，再加入 1%（V/V）
雞紅細胞懸液 0.025ml，血凝板震蕩混勻，室溫放置 15～40 分鐘或
置 2～8℃40～60 分鐘。
2.1.2 結果判定 將血凝板傾斜 60 度，當對照孔中的紅細胞呈顯
著(zhù)流淌的淚滴狀時(shí)判讀結果。以使紅細胞完全凝集的最高稀釋度作為
血凝價(jià)。
2.2 血凝抑制試驗（HI）
2.2.1 依據抗原 HA 血凝效價(jià)，配制 4 個(gè)血凝單位抗原（4HAU）。
舉例:血凝效價(jià)為 1:128，即 128/4=32（即稀釋倍數為 1:32）。取 PBS
9ml,加入抗原 1.0ml,（即成 1:10 稀釋?zhuān)┱鹗幓靹蛉?1.0ml，加入
2.2mlPBS 中，使最終濃度為 1:32。對其血凝價(jià)進(jìn)行回歸檢驗校準后，
2～8℃存放待用。
2.2.2 96 孔微量血凝板 1-11 孔加入 PBS0.025ml，第 12 孔加入
PBS0.05ml，取待檢血清 0.025ml 加入第 1 孔中，反復稀釋 5～10 次
混勻，從第 1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔，稀釋混勻取 0.025ml 加入
第3孔，依此倍比稀釋至第10孔。取4HAU于1-11孔每孔加入0.025ml，
血凝板震蕩混勻，37℃作用 20 分鐘。再每孔加入 1%（V/V）雞紅細
胞懸液 0.025ml。第 11 孔為 4HAU 對照孔，第 12 孔為紅細胞對照孔。
將血凝板震蕩混勻，室溫放置 15～40 分鐘。
2.2.3 結果判定 將血凝板傾斜 60 度，若 4HAU 對照孔無(wú)紅細胞
凝集，紅細胞對照孔有紅細胞凝集，且呈明顯流淌的淚滴狀時(shí)，試驗成立，可判讀結果。使紅細胞凝集被完全抑制的血清最高稀釋度判為
被檢血清 HI 效價(jià)。
【注意事項】
1．倍比稀釋時(shí)，吸液、吐液動(dòng)作不應過(guò)快，防止污染其他孔及
取量不準確。
2．4HAU 應現用現配，使用時(shí)充分混勻。
3．使用 1%雞紅細胞懸液時(shí)，應輕搖混勻。
4．因環(huán)境溫度不同，判定結果時(shí)，可依據對照孔情況，適當調
整作用時(shí)間。
5．設立陰、陽(yáng)性血清對照，且當陰性對照血清 HI 效價(jià)≦1:4、
陽(yáng)性對照血清 HI 效價(jià)與已知結果相比，誤差≤1 個(gè)稀釋度時(shí)，試驗
方可成立。
6.抗原使用前需用無(wú)菌生理鹽水復溶。
【規格】 2ml/瓶
【貯藏與有效期】 -15℃以下保存，有效期為 12 個(gè)月
【包裝】 10 瓶/盒
僅供獸醫診斷使用
本文鏈接：http://wap.91anmoyi.cn/news/wenku-qlgh9.html
