實(shí)驗室支原體污染檢查驗證六種鑒別辦法簡(jiǎn)述
日期:2021-08-20 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽:1342 次
第一種:分離培養法
支原體的致病性檢測為主要通過(guò)從受污染的細胞組織中分離培養支原體來(lái)確定。分離培養法是支原體污染檢測最可靠最準確的方法。然而支原體對環(huán)境的影響非常敏感,極易被滅活,分離培養操作相對麻煩并且檢測周期長(cháng)。通常只能對支原體污染檢查進(jìn)行定性觀(guān)察。分離和培養方法常用于輔助支原體常規檢測中的其他檢測方法。
第二種:DNA熒光染色法
DNA熒光染色法相比分離培養法減少了檢查驗證時(shí)長(cháng),常用于細胞培養中污染支原體的檢測。DNA熒光染色法是基于熒光染料可以與支原體DNA中的AT堿基富集區結合的原理。中海檢查被支原體污染的細胞染色后,在細胞核外和細胞周?chē)梢钥吹皆S多大小均勻的組織。
第三種:ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗
ELISA一般用于檢測支原體污染檢驗,具有良好的特異性和靈敏度高,可統一完成大量樣品的檢測,擁有快速定量定性簡(jiǎn)單檢測等諸多特點(diǎn)。
第四種:PCR技術(shù)
PCR有著(zhù)快速靈敏特異簡(jiǎn)便的基因診斷技術(shù),PCR檢測技術(shù)已被用于科學(xué)研究和疾病診斷等支原體污染鑒別,其可統一檢測大批量樣本,其有周期短/靈敏度高/特異性好/操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)。中海生物依據支原體基因組中的保守序列設計特異性引物,對待測樣品的核酸進(jìn)行擴增,通過(guò)分析擴增產(chǎn)物的大小進(jìn)行診斷。
第五種:電子顯微鏡
通常細胞培養需兩至三天時(shí)間,在細胞接近結合前,將細胞胰酶消化制成細胞懸液,然后用電子顯微鏡在觀(guān)察前采用固定嵌入和分段等流程。
第六種:定時(shí)周期性檢查
通常情況支原體感染會(huì )使培養的細胞逐漸滅亡,所以對培養的細胞進(jìn)行定期支原體檢測非常重要。支原體污染檢查驗證重點(diǎn)是對實(shí)驗室細胞培養進(jìn)行常規支原體污染檢測的規范化,做到每30~90天做一次支原體檢查驗證。
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