現在科學(xué)技術(shù)和新興產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，ELISA試劑盒對化學(xué)試劑的純度\純度\精密度的需求越來(lái)越嚴格和專(zhuān)業(yè)化。ELISA試劑盒的挑選很重要，中海生物認為大致有四個(gè)方面:

?檢測方法

盡管，ELISA試劑盒的檢測方式方法有很多，我們可以按照自身的偏好來(lái)選購。通常ELISA檢測酶促反應的可溶性產(chǎn)物，抗體與相對應的酶結合，反應體系中添加相對應的底物。這樣的酶促反應造成特征顏色，可以用分光光度計檢測。堿性磷酸酶ap也是一類(lèi)常見(jiàn)的酶。該酶可以與第一抗體或第二抗體結合，同時(shí)鏈霉親和素標記的酶也能夠與親和素標記的第一抗體結合。另外ELISA結果還包含放射性檢測/熒光檢測/化學(xué)發(fā)光或顯色檢測等。

?實(shí)驗操作形式

盡管類(lèi)型諸多，但會(huì )出現一項相同的特點(diǎn)，便是抗原捕獲。捕獲的通常形式包含將抗原吸附到微孔板或在微孔板上用抗體捕獲。酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)和in-cell Elisa是兩種特殊類(lèi)型。in-cellElisa需要將微孔板培養的細胞固定化/通透化，隨后用抗體原位檢測。酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)有點(diǎn)像蛋白印跡，先將細胞培養在膜微孔板中，隨后在膜上檢測細胞分泌的抗原，形成斑點(diǎn)。另外中海建議需要按照自身的需要選購九十六孔板或四十八孔板進(jìn)行Elisa實(shí)驗操作。

?抗體形式

單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用作Elisa，但有時(shí)候兩者的組合更好。例如雙抗體夾心法，用多抗體捕捉，用單抗體檢測，有時(shí)候更有幫助。多抗體可以確保捕獲全部抗原，隨后單克隆抗體可以特異性檢測具有特定表位的抗原。

?交叉反應

假如抗體之間有沖突或交叉反應，會(huì )影響所有實(shí)驗操作的特異性?？贵w來(lái)源的相容性是交叉反應的一項原因。盡管從支釘動(dòng)物身上購買(mǎi)抗體越來(lái)越容易，但仍然需要確認是不是會(huì )出現交叉反應。用雙抗體夾心法進(jìn)行Elisa時(shí)，檢測用的第二抗體務(wù)必對第一抗體有特異性，但無(wú)法與捕獲抗體反應。假如檢測二抗和捕獲抗體結合，實(shí)驗操作的特異性會(huì )大幅度降低。中海通常選購不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗來(lái)規避以上問(wèn)題。

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